Головна » Імунологія » Вихідні антітелообразующіе клітини. Предетермінірованность клітин


На даний момент немає єдиної думки з питання про те, як в організмі дорослої тварини можуть утворитися клітини, що синтезують величезний набір розрізняються по специфічності і будовою антитіл. Незалежно від точки зору, якоїдотримується дослідник, він повинен очікувати, що популяції В-лімфоцитів (до якої відносяться як АОК, так і їх попередники) властива значна мозаїчність.

Ця мозаїчність може відображати різницю соматичних процесів (Мутацій, перестановок або перегрупувань генетичного матеріалу) в окремих лімфатичних клітинах, що призводять до виникнення різних генів, необхідних для синтезу того чи іншого антитіла. Вона може бути пов'язана з малою ймовірністю поєднання ряду біохімічних процесів, необхідних для того, щоб антиген вплинув на білковий синтез в лімфатичної клітці.

І, нарешті, мозаїчність вихідної популяції В-лімфоцитів може бути обумовлена тим, що хоча в будь-якому з цих лімфоцитів присутній набір генів, здатних контролювати будова всіх антитіл, але в кожному окремому лімфоцит активний лише один з них.

Більшість дослідників припускає, що клітини кожного окремого елемента цієї мозаїки є нащадками однієї клітини, тобто складають клон клітин. Особливий імпульс вивченню цього питання було дано появою клонального теорії Бернета (Burnet, 1957; Бернет, 1971), згідно з якою ця мозаїчність виникає до і незалежно від дії антигену.

На даний момент використовують ряд підходів для докази того, що в популяції В-лімфоцитів ще до потрапляння в організм антигену присутні клітини, предетермінірованние для перетворення в АОК, які синтезують певне антитіло (попередники АОК - ПАОК).

В першу чергу для цього використовують так зване радіоактивне вбивство (Ada, Byrt, 1969). З метою «вбивства» ПАОК суспензію клітин кіс неімунізованих мишей обробляли антигеном (наприклад, полімерізірованний флажеліну), сильно міченим радіоактивним ізотопом (наприклад, 125I). Виявилося, що суспензія клітин, оброблених таким чином, стає нездатною утворювати в подальшому антитіла проти антигену, що використовувався для вбивства, але утворювала антитіла проти інших антигенів (Ada, Byrt, 1969; Willcox ea, 1975).

Ці досліди наочно вказують на існування ще до імунізації специфічних попередників АОК і на можливість їх виборчого видалення. Необхідно, однак, враховувати, що придушення антитілоутворення в подібних дослідах зазвичай неповно і оборотно.

Друге доказ предетермінірованності засноване на тому, що видалення з суспензії лімфатичних органів неімунізованих тварин клітин, специфічно реагують з певними антигенами, послаблює утворення ними антитіл до цих антигенів при подальшій імунізації.

Особливо ефективне використання антигенів, Іммобілізованих на нерозчинної основі (Wigzell, Anderson, 1969). За допомогою цих сполук (Імуносорбент) з суспензії кіс неімунізованих тварин були витягнуті клітини, що реагують з багатьма антигенами: сироватковими альбумінами людини і бика, яєчним альбуміном, динітрофенол, нітройодфенолом, лактозідом та іншими речовинами (Wigzell, Anderson, 1971; Wofsy ea, 1971).

Приєдналися до Імуносорбент клітини можна отримати тим чи іншим способом. Наприклад, якщо в якості основи для Імуносорбент використовується желатину, то сорбент можна розтопити і видалити при 30 - 37 ° С без пошкодження клітин (Rutishauser е. а., 1973). Залишки цього сорбенту можна прибрати колагеназою (Haas, Layton, 1975). В деяких випадках більше 90% витягнутих клітин були В-лімфоцитами.

На специфічність приєднання клітин вказує те, що воно різко знижується при наявності в середовищі надлишку відповідного антигену в розчинній формі. При оцінці подібних дослідів слід враховувати, що до Імуносорбент приєднується несподівано велике (до 05% клітин селезінки неімунізованих тварини) кількість клітин.

У популяції клітин, витягнутих описаним чином, визначалося число АОК, специфічних до іммобілізованого антигену. Виявилося, що їх число може бути в 100 чи навіть в 300 разів більшим, ніж в нефракцнонірованной суспензії (Haas, 1975). Однак на цей розрахунок може вплинути цілий ряд трудноучітиваемих моментів: звільнення при описаної процедури від супресорних Т-клітин, контакт В-клітин як з іммобілізованими антигеном, так і зі слідами цього ж антигену, що перейшло в розчин.



...


1 (0,09101)