За допомогою фазово-контрастного мікроскопа можна побачити живі бактерії, проте частіше бактерії попередньо фіксують і фарбують.
Одним зметодів фарбування, Що дозволяє ідентифікувати бактерії, є фарбування за Грамом. Вперше цей метод був запропонований данським лікарем Крістіаном Грамом в 1884 р. До фарбування всі бактерії безбарвні. Після фарбування грампозитивні бактерії стають фіолетовими, а грамотрі-цательние бактерії - червоними. Відмінності між цими двома типами бактерій описані в нашій статті (клітинна стінка).
Деталі процедури фарбування дані вексперименті.
Культивування вірусів
Культивування, Або вирощування, вірусів - процедура складніша, ніж вирощування бактерій, тому що віруси растуг і розмножуються тільки усередині живих клітин. Можна інфікувати цілий організм, наприклад рослина чи тварина, проте зараз стараються, де це можливо, використовувати культури клітин або тканин. Раніше використовували метод культивуванняпевних вірусів в курячих ембріонах під час їхнього росту всередині яйця. Схожа процедура вирощування вірусів в амніотичної рідини, що оточує курячий ембріон, застосовувалася при виготовленні вакцин проти свинки та грипу.
Культура клітин - Це суспензія клітин в рідкому середовищі, а культура тканин це маленькі шматочки органу рослини або тварини в рідкій або на твердому середовищі. У культурі клітин рослин зазвичай використовують меристеми, тобто такі ділянки, як кінчики кореня або пагонів, де клітини активно діляться. Матеріал можна взяти з зараженого рослини, або інфікувати культуру відповідним вірусом. Культуру клітин тварин зазвичай отримують шляхом вирощування окремих клітин у вигляді одного шару на поверхні скляного контейнера (моно-шарова культура). Поліовірус був вперше вирощений в такій культурі, отриманої з нирки мавпи. Для отримання культури тканини використовувалися також клітини з легких, амніону і ракових пухлин людини.
Лабораторна робота
Мета практичних занять - освоєння деяких основних бактеріологічних методів. Як щодо безпечного джерела бактерій ми рекомендуємо використовувати молоко. Молоко служить прекрасною їжею не тільки для ссавців, а й для багатьох бактерій.
Зміст бактерій в молоці
Навіть при максимальному дотриманні правил гігієни бактерії неминуче потрапляють в молоко під час доїння і подальшої обробки. Парне молоко зазвичай відразу охолоджують, щоб уповільнити розвиток бактерій. Необроблене (сире) молоко пастеризують, тобто прогрівають, щоб убити патогенні бактерії. При цьому багато непатогенні бактерії виживають. У молоці присутні наступні бактерії:
1. При 15-30 ° С переважає Streptococcus lactis (грампозитивний мікроорганізм) і багато інших стрептококи (теж грампозитивні), а також Корін-формні (булавоподібні) бактерії (наприклад заходів, Microbacterium, Brevihacterium) f які схожі на Lactobacillus, але мають потовщення на кінцях паличок.
Streptococcus lactis добре росте при 10 ° С, але при температурі понад 40 ° С його ріст припиняється.
2. При 30-40 ° С домінують різні види Lactobacillus (грампозитивні) і кишкові бактерії (грамнегативні), наприклад Е. coli.
Streptococcus lactis і Lactobacillus відносяться до молочнокислим бактеріям. В процесі бродіння (анаеробного дихання) вони утворюють з лактози (молочного цукру) молочну кислоту, яка, накопичуючись, викликає скисання молока. Колонії S. lactis і Lactobacillus відносно малі (максимальний діаметр колонії не перевищує декількох міліметрів), не пофарбовані і виглядають білими, як крейда. 5. lactis утворює гладкі колонії з рівними краями. Якщо в поживний агар додати дрібно подрібнений карбонат кальцію, то навколо кожної колонії утворюються прозорі зони, де молочна кислота розчиняє карбонат кальцію. Стрептококи необхідні для нормального скисання молока. Вони мають сферичну форму і утворюють ланцюжки.
Клітини Lactobacillus мають палочковидную форму, і легко злипаються, утворюючи довгі ланцюжки. Колонії мають шорстку поверхню і нерівні краї.
У молоці можна знайти й ряд інших бактерій, у тому числі яка живе в кишечнику паличку Alcaligenes (грамнегативна), клітини якої можуть бути поодинокими або утворювати ланцюжки. Їх можна розпізнати на агарі Макконкі по жовтуватою (лужний) зоні навколо кожної колонії.