Головна » Імунологія » Центр імуноглобуліну G. Активний центр IgG


Рентгеноструктурним методом при високому дозволі були вивчені Fab-фрагменти двох мієломних білків - IgG людини (New) я IgA (МРРС 603) миші. Було виявлено, що перший з цих білків реагує при високому ступені спорідненості з рядом сполук, зокрема з оксіпроізводних вітаміну K1 (K1-ОН). Другий мієломної білок, що синтезується мієлому мишей МРРС 603 здатний преципітувати з кількома природними антигенами, в тому числі з полісахаридами пневмококів, а також реагувати з фосфорілхоліпом, який є активною частиною зазначеного антигену.

Обидва ці білка є гарною моделлю для вивчення комплексів антиген-антитіло, Оскільки вдалося отримати кристали їх Fab-фрагмснтов разом з відповідними гаптенами.

На атомних моделях Fab-фрагментів, Побудованих на підставі рентгеноструктурпих даних, видно, що варіабельні домени легкої і важкої ланцюга з'єднані таким чином, що гіперваріабельні ділянки утворюють єдину поверхню контактує з антигеном. Порожнина активного центру в обох білків відрізнялася за своєю формою і величиною.

У білка МРРС 603 активний центр являє собою досить глибоку западину, шириною близько 15 А і глибиною 12 А, тоді як у білка New він схожий на неглибокий жолоб, ширина і глибина якого рівні приблизно 6 А, а довжина - 15 А. Ці відмінності обумовлені вставками в трьох Гіперваріативна ділянках білка МРРС 603. На малюнку показана область активного центру білка New з розташованим у ньому гаптеном (вітамін Ki-ОН). Порожнина сформована 23 залишками з Гіперваріативна сегментів L1 і L3 легкої ланцюга я сегментів HI, H2 і НЗ важкого ланцюга.

Нафтохіноновая кільце гаптена знаходиться в тісному контакті з фенольним кільцем тирозину (Тир-90) легкого ланцюга та іншими двома залишками цієї ж ланцюга і одним залишком важкого ланцюга. Фітіловая частина гаптена взаємодіє з чотирма залишками важкого ланцюга і далі з бічними групами трьох інших залишків гіперваріабельної області Н2. Усього цей гаптен реагує приблизно з 10 залишками, тобто тільки з частиною всіх залишків активного центру.

Як вказувалося вище, порожнину активного центру мишачого білка МРРС 603 більше і формується з 35 залишків Гіперваріативна областей як легкого, так і важкої ланцюга. Фосфорілхоліном розташовується в глибокій западині. Холінового частина реагує з залишками як важкої, так і легкої ланцюга, тоді як фосфат взаємодіє лише з залишками важкого ланцюга. Так само як і в попередньому випадку, гаптен заповнює лише частина порожнини активного центру. Залишається частина, мабуть, здатна реагувати з нооітелем гаптена.
При вивченні деяких властивостей активних центрів вельми корисним виявився метод спінової мітки (Інгрем, 1972).

Вперше спін-мічений гаптен для вивчення активних центрів антитіл використовували Страйер і Гріффіт. Гаптен складалися 24-дінітрофснола (ДНФ), до якого було отримано антитіло, і приєднаного до нього імінокенльного радикала. В результаті утворення специфічного комплексу спостерігалася сильна іммобілізація спін-міченого гаптепа. Обмеження свободи обертання гаптена в порожнині активного центру може бути викликано стеричним перешкодами, гідрофобними і вандерваальсовимі взаємодіями і свідчить про значну структурної жорсткості активного центру.



...


1 (0,00151)