Цоліклони анти-А і анти-В призначені для визначення груп крові людини системи АВО замість стандартних ізогем-аглютинативна сироваток.

Визначення груп крові системи АВО включає виявлення антигенів А і В в еритроцитах стандартнимиантитілами і виявлення аглютинінів в сироватці або плазмі досліджуваної крові стандартними еритроцитами. Антигени А і В визначають за допомогою Цоліклони анти-А і анти-В. У донорів обов'язково визначення не тільки антигенів в еритроцитах, але і агглютининов в сироватці (плазмі) за допомогою стандартних еритроцитів.

Основні властивості цоліклональних сироваток.

Цоліклони анти-А і анти-В є продуктом гібридомної клітинних ліній,отриманих в результаті злиття мишачих антітелообразующіх В-лімфоцитів з клітинами мишачої мієломи. Індивідуальні гібридомної лінії продукують гомогенні антитіла тільки одного класу імуноглобулінів, які повністю ідентичні за структурою та біологічної активності. Антитіла, які продукують клітинами одного клона (потомство однієї клітини), є моноклональними.

Довідка. Клональні антитіла.

Культура клітин однієї специфічності, що походять з одного лімфоцита, утворює клітини одного клону. Головне полягає в наступному: необхідно отримати від однієї клітини специфічні антитіла і напрацювати їх у необмеженій кількості. Складність полягає в подоланні двох завдань: по-перше, нормальні клітини після декількох ділень гинуть, по-друге, тільки ракові клітини здатні необмежено розмножуватися. Для вирішення цих двох несумісних проблем в 1975 році Г. Келер і К. Мільштейн створили клітинні гібриди, або гібридоми. Гібридоми - це злиття нормальних лімфоцитів у живильному середовищі з клітинами мієломи. Лімфоцити в цьому середовищі не гинуть, а від мієломної партнера отримують можливість нескінченно розмножуватися. Таким чином, гібридомної клан розмножується, а в результаті цього процесу утворюються моноклональні антитіла.
Лімфоцити, що несуть агтлютіноген А, Виробляють специфічне антитіло анти-А; лімфоцити, що несуть агтлютіноген В, виробляють специфічне антитіло анти-В.

Моноклональні анти-А і анти-В антитіла продукуються двома різними гібридоми. Цоліклони анти-А і анти-В є розведену асцітную рідина мишей-носіїв відповідної гібридоми, в якій містяться специфічні імуноглобуліни класу М (IgM), спрямовані проти группоспеціфіческіх антигенів А або В людини.
Таким чином, Цоліклони не містять антитіл іншої специфічності і тому не викликають неспецифічної поліагглютінаціі еритроцитів.

Авідність, то є час настання реакції аглютинації і її вираженість, у Цоліклони анти-А і анти-В вище, ніж у ізогемагглютінірующіх АВО-сироваток, особливо у випадку слабко виражених антигенів еритроцитів.
Цоліклони не є клітинами людських тканин, що виключає можливість інфекційного зараження.

Методика визначення груп крові за допомогою Цоліклони анти-А і анти-В.

Визначення груп крові системи АВО реагентами Цоліклони проводиться в нативної крові, стабілізованої за допомогою застосовуваних консервантів (глюгіцір, цітроглюкофосфат, гепарин та ін); в крові, взятої з пальця; в крові, взятої без консерванту. Найбільш чітка реакція аглютинації спостерігається при використанні високої концентрації еритроцитів.

Визначення групи крові проводиться в приміщенні з хорошим освітленням при температурі від +15 ° до +25 ° С. Реагенти не повинні зберігатися відкритими, так як при висиханні активність антитіл знижується. Не слід користуватися реагентами, якщо в них є нерозчинні пластівці або помутніння. Для кожного реагенту використовують свою марковану (анти-А або анти-В) піпетку. Визначення групи крові системи АВО проводиться звичайними методами на білій порцеляновій або будь-який інший планшетки з змочувані поверхнею.

Висока активність і авідність реагентів Цоліклони дозволяє застосовувати по одній серії реагентів анти-А і анти-В. На площину планшета або тарілку наносять Цоліклони анти-А і анти-В по дві краплі (01 мл) під відповідними написами: анти-А або анти-В. Поряд з краплями антитіл наносять досліджувану кров по одній маленькій краплі, приблизно в 10 разів менше (001 мл). У разі визначення групи крові, взятої з пальця або взятої без консерванту, необхідно брати велику кількість еритроцитів, тобто перші краплі з пальця (без сильного видавлювання) або вільні еритроцити з осаду згорнутої крові.

При визначенні групи крові антитіла і кров змішують скляною паличкою або кутом предметного скла, які промивають і насухо витирають перед розмішуванням кожної краплі. Спостереження за реакцією проводять при легкому погойдуванні протягом не більше 25 хвилини. Позитивний результат при визначенні групи крові виявляє себе агглютинацией (склеюванням) еритроцитів. При цьому агглютінати можна побачити без будь-яких пристосувань у вигляді дрібних червоних агрегатів, швидко зливаються і утворюють великі пластівці.
При негативній реакції визначення групи крові крапля залишається рівномірно забарвленою в червоний колір, агтлютінати в ній не виявляються. Аглютинація, зазвичай, визначається протягом перших 3-5 секунд. Незважаючи на це, спостереження за результатами необхідно вести не менше 25 хвилини через можливість більш пізнього настання аглютинації з еритроцитами, що містять слабкі різновиди антигенів А або В.