Медичні статті » Пульмонологія » Бактеріологічний метод діагностики туберкульозу. Вплив хіміотерапії на діагностику туберкульозу


Переважна більшість дослідників по частоті виявлення мікобактерії туберкульозу віддають перевагу бактеріологічному методу дослідженняпатологічного матеріалу. Переконливі в цьому відношенні дані Holm і співавт. (1941). Грунтуючись на ретельній статистичної обробки результатів 92 759 досліджень, проведених різними способами, автори показали, що при прямій бактеріоскопії мікобактерії виявляються в середньому в 77% досліджень, а при посівах того ж матеріалу - в 2007%. І в цьому немає нічого дивного. Як відомо, мікобактерії туберкульозу знаходять в нативному препараті і при забарвленні за Цілем-Нельсену лише втому випадку, якщо в 1 мл досліджуваного матеріалу міститься не менше 100 000 - 500 000 їх примірників. Методом флотації вдається виявити мікобактерії при наявності в 1 мл мокротиння близько 1000 примірників, а для отримання первинних культур досить наявності 20-100 мікробів. Таким чином, частота виявлення мікобактерії підвищується при посіві мокроти і іншого матеріалу на щільні або рідкі синтетичні, напівсинтетичні і кров'яні поживні середовища. У практичних умовах посіви виробляють нащільні поживні середовища Левенштейна-Йенсена, на безаспарагіновую середу Фінн-2 середу «Нову».

Найкращі результати отримують при одночасному використанні двох різних щільних середовищ. При цьому не слід обмежуватися одноразовим або навіть повторним дослідженням, а необхідно послідовно, через відомі інтервали виробляти посіви мокротиння або промивних вод бронхів. Доцільність такої діагностичної тактикипідтверджується повсякденним досвідом і, зокрема, спостереженнями, проведеними в Інституті туберкульозу в Будапешті. При триразовому дослідженні методом посіву мокротиння у значної групи хворих на туберкульоз легень мікобактерії були виявлені у 703% з них, після 5 аналізів - у 807%, а після 10 - у 979%.

При бактеріологічному способі дослідження вдається не тільки виявити і підрахувати кількість вирослих колоній мікобактеріїтуберкульозу, А й вивчити їх різні властивості, диференціювати від кислототривких сапрофітів і атипових штамів, визначити типову приналежність, ферментативну активність, лікарську чутливість і ін

Успіхи різних способів культивування мікобактерії, Природно, обмежили сферу застосування біологічного методу дослідження, тобто зараження тварин досліджуваним матеріалом. Але вони ні в якій міріпе виключають його. Шляхом зараження високочутливих до туберкульозу лабораторних тварин, головним чином морських свинок, можна виявити мікобактерій, навіть якщо вони містяться в досліджуваному матеріалі в невеликій кількості. Ця обставина набуває, звичайно, дуже важливе діагностичне значення. Тим же способом вдається краще диференціювати вірулентні і атипові штами від сапрофітів, визначити тип мікробів, до яких одні види тварин чутливі, а інші стійкі, а такожвстановити патогенність і вірулентність мікобактерій туберкульозу.

Слід підкреслити, що при специфічної хіміотерапії утруднюється виявлення мікобактерій в різних виділеннях, рідинах і тканинах організму хворого. Це явище пов'язане з тим, що під впливом антибактеріальних препаратів, особливо при тривалій терапії, знижується життєздатність мікобактерій і змінюються їхморфологічні властивості і хімічний склад, що відбивається на тинкторіальні здібності, тому що може вести до зниження або втрати властивою мікобактерій кислотоустойчивости. Мертві мікобактерій за Цілем-Нельсену фарбуються так само, як і живі. Для їх диференціації застосовують спеціальні методи забарвлення. Так, живі мікобактерій, в яких міститься нативная дезоксирибонуклеиновая кислота, фарбуються метиловим зеленим. Загиблі мікроби краще фарбуються піроніном в рожевий колір, асафраніна - в червоний. При докраске карболовим фуксином живі мікобактерій фарбуються в зелений колір, а загиблі - в червоний.

При лікуванні хворих похідними ізонікотинової кислоти часто утворюються, крім того, каталазоотріцательние і слабовірулентних для деяких видів лабораторних тварин (морських свинок і кроликів) лекарственноустойчівих штами. Спостерігається й інше парадоксальне явище: відсутність росту напоживних середовищах мікобактерій туберкульозу, які в той же час можна іноді виявити при бактеріоскопії. У таких випадках мікобактерій представляються слабо-і нерівномірно забарвленими, а при електронно-мікроскопічному дослідженні в них виявляють набряклі і гомогенізовані ядра. У міру подальшої дезінтеграції цитоплазми з'являються порожні, або «голі», мікробні клітини з набряклої та місцями зруйнованої оболонкою, а потім і пилоподібні їх форми. Однак морфологічних відмінностей міжстійкими і лекарственночувствительными штамами мікобактерій туберкульозу навіть при електронній мікроскопії встановити не вдається.

Розпізнавання таких біологічно і морфологічно змінених форм збудника туберкульозу, Особливо в умовах повсякденної практики, природно, зустрічає труднощі. Цим частково можна пояснити, що у деяких хворих навіть деструктивним туберкульозом легень не знаходять мікобактерій туберкульозув мокроті вже незабаром після розпочатої хіміотерапії. Немає сумніву, що тільки у частини з них відбулося стійке і повне морфологічне і біологічне оздоровлення стінок туберкульозних каверн. У решти має місце уявна абаціллярность, що підтверджується можливістю загострення процесу при динамічному спостереженні, а також виявленням мікобактерій в порожнині або стінках каверни при спеціальному дослідженні. У цьому можна переконатися, якщо зробити пункцію, здавалося б, излеченной каверни ідослідити її вміст після промивання фізіологічним розчином. Користуючись таким методом, Neef (1966) з 49 хворих із залишковими, здебільшого невеликими (до 05 см в діаметрі), посттуберкулезнимі порожнинами в легких у 11 хворих, тобто майже в 1/4 випадків, виявив мікобактерій, які не вдавалося знайти в мокроті або в промивних водах бронхів всіма доступними способами.

Таким чином, в умовах сучасної хіміотерапії виникає необхідність подальшого удосконалення методів виявлення мікобактерій туберкульозу. У той же час обов'язковою умовою є одночасне динамічне комплексне застосування різних лабораторних методів дослідження патологічного матеріалу: бактеріоскопії, посіву, по можливості зараження лабораторних тварин. Необхідно, крім того, використання ряду спеціальних методів для виявлення не тільки класичних, але й інших варіантів збудника.

Так, застосовуючи нові живильні середовища, А також пеніцилін і дигідрострептоміцин, можна виділити з мокротиння, спинномозкової рідини, сечі і тканин хворих на туберкульоз L-форми мікобактерій у вигляді дрібних зерен і кулястих тел.

При диференціації типових і атипових мікобактерій використовують комплекс багатьох методів дослідження: визначають кислотно-і спиртостійкі мікобактерій; вивчають особливості їх росту при різній температурі, на окремих поживних середовищах, при наявності і відсутності сонячного світла; досліджують морфологію культур та здатність утворювати пігмент; встановлюють ступінь чутливості до туберкулостатичних препаратів. Істотне діагностичне значення мають деякі біохімічні тести: амідазний і ніацінового, визначення каталазної, дегідрогеназну, пероксидазної, уреазной і ліпазной активності і реакція відновлення нітратів. Про вірулентності тих чи інших штамів мікробів судять за результатами визначення корд-фактора і цитохімічним тестам. Їх патогенність встановлюють при зараженні морських свинок, білих мишей, кроликів, курей. Ці дослідження доповнюються вивченням антигенних структур, а також алергічними пробами з туберкуліном і сенсітінамі, серологічними реакціями у хворих.

Певну роль в клініці туберкульозу органів дихання відіграє вторинна - змішана - інфекція, що пов'язано насамперед з тим що при ньому нерідко відзначаються хронічний бронхіт і пневмонія, пневмосклероз, бронхоектази. Ці зміни можуть супроводжувати туберкульозу або стають його ускладненням, особливо при тривалому перебігу. У тому та іншому випадку, зазначають Н. В. Татарський та А. Я. Цігельнік (1968), створюються умови для прояву активності вторинної флори і розвитку ряду клінічних симптомів: підвищення температури, збільшення кількості мокротиння, наростання катаральних явищ в легенях, амілоїдозу і т. д. При бактеріологічному дослідженні при цьому виявляють різного виду стрептококи та стафілококи, грампозитивні та грамнегативні коки, кишкову паличку і т. д. Всі вони мають різну ступінь чутливості до окремих антибіотиків. При цьому обов'язковою є виділення чистих культур і визначення їх патогенності.

При диференціальної діагностики туберкульозу і глибоких мікозів-аспергільозі, гистоплазмоза, актиномікозу, кокцидіомікозу, нокарідіоза, кандидомікозу і т. д. - важливо не тільки ретельно досліджувати нативні і пофарбовані препарати мокротиння на присутність дріжджоподібних грибів роду Candida, Coccidoides immitis, Histoplasma capsulatum, Aspergillus fumigatus і т. д ., а й виробляти посіви на спеціальні живильні середовища, головним чином на середу Сабуро з агаром або без нього. Позитивні результати набувають більше діагностичне значення, якщо одночасно у хворих виявляються шкірні реакції на кокцідіоідін, гістоплазміном, аспергіллін, бластоміцін та ін, а також серологічні реакції з відповідними антигенами (реакція преципітації, зв'язування комплементу).



...


2 (0,40495)